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抗原檢測and核酸檢測你了解多少呢?
源葉生物 / 2022-04-18

 2022年,新冠歷經(jīng)3年,本以為已經(jīng)平息的國內(nèi)新冠疫情又隨著奧密克戎及其變異株的強傳播性和隱匿性而復燃。同時,全球也正經(jīng)歷著新冠疫情第四波流行高峰。今年,國家衛(wèi)健委最新發(fā)布了抗原檢測方案,新的新冠檢測方案引起了大家的高度關注。
目前,上海在全市范圍內(nèi),主要通過抗原檢測和核酸檢測相結合的方式進行篩查工作。

 

 

那么,抗原檢測與傳統(tǒng)的核酸檢測有什么區(qū)別呢?都是什么原理呢?

讓我們來細看一下:

抗原檢測和核酸檢測的相同點是什么?

抗原檢測和核酸檢測都屬于體外診斷,是指對人體樣本(血液、體液、組織等)在體外進行檢測而獲取臨床診斷信息,進而判斷疾病或機體功能的產(chǎn)品和服務。體外診斷主要分為免疫診斷、分子診斷、生化診斷、血液和體液學診斷等方法。不同診斷方法的檢測原理和技術手段不同,應用領域也存在較大差異。

抗原檢測和核酸檢測的區(qū)別是什么?

抗原檢測和核酸檢測就是兩種不同的技術手段,檢測病毒不同的物質(zhì)。抗原檢測通過檢測病毒的特異性蛋白,相當于是病毒穿的外衣;而核酸檢測則是檢測病毒的核酸基因片段,是病毒內(nèi)的基因。

抗原檢測的特點:快速、簡便。目前已經(jīng)推出了多款抗原檢測的試劑盒,不需要專業(yè)人員采樣,不需要專門的設備,在家就能自行檢測,一般幾分鐘即可出結果。但是抗原檢測必須要求樣本已經(jīng)含有大量抗原,出現(xiàn)癥狀5天以內(nèi)的人群中進行檢測才更準確有效。

核酸檢測特點:精準。核酸檢測則需要專門的PCR儀,進行病毒基因特異片段的擴增過程,可以將很少量的病毒基因片段擴增至檢測限以上,因此哪怕只有少量的病毒核酸也能被發(fā)現(xiàn),有助于早期病例的發(fā)現(xiàn)。

 

因此,核酸檢測結果才是目前診斷新冠病毒感染的“金標準”。

抗原檢測是什么原理?

新冠抗原檢測采用膠體金的方法,新型冠狀病毒的N蛋白可作為免疫原,在病毒感染人體后,刺激漿細胞產(chǎn)生特異性抗體。依據(jù)雙抗夾心ELISA原理,樣本滴加在樣本墊上,通過液相層析依次通過結合墊,NC膜上的檢測線(T線)和質(zhì)控線(C線)。結合墊內(nèi)含有標記的抗原特異性抗體,可以與樣本中的抗原(病毒蛋白)發(fā)生結合,當液流到達檢測線(T線)時,固定在這條線上的第二種抗原特異性抗體再次與抗原結合,將會呈現(xiàn)陽性結果。質(zhì)控線(C線)包被IgY抗體,可以結合樣本墊中抗體,用于判斷層析過程是否順利。

 

核酸檢測是什么原理?

目前的核酸檢測是通過探針法原理,利用堿基配對的原則,使用熒光探針進行實時跟蹤測定。將帶有標記的已知DNA或者RNA序列作為核酸探針,與待測樣品中互補的序列配對退火形成雙鏈,通過這一核酸雜交的過程,檢測核酸樣品中特定基因序列。每一種病原體都具有獨特的核酸片段或者片段的獨特組合,比如新冠病毒的ORF1ab基因、N基因等。

新冠病毒的檢測中,使用的就是寡核苷酸引物和探針。目前國家藥品監(jiān)督管理局批準的幾十個新冠病毒核酸檢測試劑盒中,采用熒光PCR法的占大多數(shù);

熒光PCR法,目前通常為實時熒光定量PCR,這一技術是普通聚合酶鏈式反應PCR技術的拓展。在原始的PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR放大擴增特定的DNA片段的進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析。

PCR擴增時加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,無法檢測或只有微弱熒光;PCR擴增時,Taq酶的5'3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,熒光信號大大增強,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到信號,每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。擴增出來的基因越多,累計的熒光信號就越強,以此來確定樣本中是否有病毒核酸,也就是確認受檢者是否被感染。

 

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