產(chǎn)品介紹
細胞
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BrdU濃度(μM)
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孵育時間(min)
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A549
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40
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40
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Hela
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40
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40
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NRK-52e
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40
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40
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SKOV3
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80
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120
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H9C2
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40
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40
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動物實驗:采用生理鹽水溶解BrdU粉末,配制成10 mg/mL濃度,過濾除菌后備用。一般按照50 mg/kg的劑量,腹腔注射給藥,共4次,每次間隔2小時,最后一次注射24小時后,處死動物。
細胞實驗:對于細胞,BrdU的使用濃度和處理時間與細胞種類有關(guān)。一般來說,處理腫瘤細胞所需濃度和時間都較低,成纖維細胞或上皮細胞等增殖較慢的細胞需要提高濃度并延長作用時間,建議濃度范圍為20-100 μM,作用時間為40 min-4 h,可根據(jù)具體細胞的種類進行摸索調(diào)整。上表為經(jīng)測試過的常用細胞處理濃度及時間,僅供參考。
Brdu說明:DNA病毒的抑制劑。在免疫組化中的應(yīng)用:BrdU標(biāo)記細胞免疫組化染色(SP法),BrdU(溴化脫氧尿嘧啶核苷)可以在體內(nèi)和體外摻入到處于S期的細胞所合成的DNA鏈中,以標(biāo)記DNA。
Brdu溶解:在1M的氫氧化銨中的溶解度為50mg/ml;也可以溶于DMF、DMSO,溶解度在50-100 mg/mL。0.16 - 500 mg/mL的Brdu可以抑制胚胎腎細胞細胞的生長,1.0 mg/mL有較強的抑制作用。
Brdu應(yīng)用:在免疫組化中的應(yīng)用:BrdU標(biāo)記細胞免疫組化染色(SP法),BrdU(溴化脫氧尿嘧啶核苷)可以在體內(nèi)和體外摻入到處于S期的細胞所合成的DNA鏈中,以標(biāo)記DNA。通過流式檢測BrdU的摻入量可以從單個細胞水平評價DNA合成細胞頻率。用于在單細胞水平檢測功能性激活,即同時檢測DNA合成、細胞表面激活抗原表達以及胞內(nèi)細胞因子分泌。包括在BrdU存在下培養(yǎng)激活的單個核細胞,固定通透后,以抗BrdU熒光抗體檢測BrdU的攝取。同時,以適宜濃度的DNA酶使胞內(nèi)DNA變性,加強摻入BrdU與抗體的親和力,同時保留胞內(nèi)蛋白結(jié)構(gòu)和熒光素?zé)晒鈴姸?。此方法避免了DNA變性條件與胞內(nèi)及表面標(biāo)志同時檢測條件的沖突。持續(xù)的BrdU的摻入可以用于確定和分析處于DNA合成活躍狀態(tài)的細胞,區(qū)分于那些處于靜止期的細胞,從而進行細胞增殖比例的分析;另一方面,不同時間點加入BrdU,可以分析細胞周期動力學(xué)。
BrdU摻入研究已在很多實驗中得到廣泛開展,包括體外和體內(nèi)標(biāo)記實驗。
注意事項:該品對肌體有不可逆損傷的可能性。使用時應(yīng)穿防護服和戴手套。應(yīng)避免吸入本品的粉塵。